전통적인 배양방법을 대신하여 최근에는 좀 더 빠르게 균을 배양할 수 있는 상업 시스템이 소개되고 있으며 대표적인 것이 BACTEC AFB System으로 MGIT broth에 접종하여 배양을 하면서 세균 대사 시 발생되는 이산화탄소 가스를 측정하는 방법이 이용되고 있다. 환자의 혈액을 배양하면서 결핵균이 발육 시 mycolic acid(fatty acid)양을 Gas-Liquid HPLC(High-Performance Liquid Chromatography System)를 이용하여 측정하는 방법도 사용된다.
또한 균의 동정방법도 전통적인 생화학 검사보다는 DNA probe법, polymerase chain reaction (PCR) 법 등을 이용하여 신속하고 예민도가 높은 방법을 통하여 동정한다. 최근에 분자생물학의 발전으로 민감도와 특이도가 매우 높은 새로운 진단법인 PCR법이 개발되어 이를 결핵균 동정에도 이용할 수 있게되었다. 임상적으로 결핵이 의심되나 항산성 염색에서 음성 또는 양성으로 나온 환자의 객담을 대상으로 PCR로 검사를 한다. PCR 검사는 Multiplex PCR 및 nested PCR 등 다양한 PCR 기법을 이용하여 Mycobacterium spp.의 특이한 염기서열 부위를 증폭하는 방법이 이용되고 있다.
비결핵성 Mycobacteria(Nontuberculous Mycobacteria, NTM)
비결핵성 항산균(NTM)은 자연환경 어디에나 존재하며 건강한 사람의 피부, 호흡기계, 위장관계에서도 분리될 수 있다. 전파경로 역시 호흡기계, 위장관계를 포함하여 원내 감염도 유발할 수 있다. 사람에서 사람 (person to person) 전파는 아주 드물고 병원성은 낮다. 하지만 최근 국내는 물론이고 세계적으로 Nontuberculous Mycobacteria(NTM) 감염은 증가하는 추세이다. 특히 면역기능이 저하된 환자에게는 NTM 감염이 심각하게 증가하고 있고 혈액배양에서 양성을 보이는 경우가 많다.
Nontuberculous Mycobacteria(NTM)은 Runyon의 분류법에 의해 배지의 집락이 빛에 노출되면 색깔을 나타내는 광발색균(photochromogen, Ⅰ군), 빛이 있이나 없으나 색깔을 나타내는 암발색균(scotochromogen, Ⅱ군), 빛의 유무에 관계없이 색깔을 나타내지 않는 비발색균(non-photochromogen, Ⅲ군) 및 집락을 7일 이내에 생성하는 신속발육균(rapid grower, Ⅳ군)으로 분류한다.
형태학적 특성은 Mycobacterium tuberculosis 와 같으며 AFB염색이나 형광염색에서 Mycobacterium tuberculosis와 비결핵성 Mycobacteria(Nontuberculous Mycobacteria, NTM)를 구별하기는 어렵다.
Hansen's 병원균(Mycobacterium leprae) (한센병)
1870년 Dr.Hansen이 나병 환자의 병소에서 처음 발견하여 Hansen bacilli라고도 불렸다. 현재 국내에서는 공식적으로 나병이라는 단어는 사용하지 않으며 한센병으로 표현하도록 지침이 내려져 있다. 한센병은 처음 비점막에 병변이 생기고, 여기서 다수의 균이 증명되면 감염원으로 생각한다. 그러나 감염양식을 명확하지 않다. 피부, 신경, 점막에 증식성 감염을 일으키며, 결절형(tuberculoid; TT), 나종형(lepromatous;LL), 중간형의 병형으로 나눌 수 있다. 세포성 면역, 체액성 면역의 이상은 병형과 관련이 있다. 임상 증상은 눈과 얼굴이 부으며 얼굴이 일그러져 사자 얼굴이 되고, 피부결절에 감각이 손실되어 있으므로 창상 화상을 잘 당하므로 2차적 세균 감염 등이 잘 생긴다. 한센병균은 결핵균과 같이 항산성이지만, 항산성은 결핵균보다 약하다. 조직의 도말염색표본에서는 덩어리로 밀집한 것을 관찰할 수 있으며, 이것은 나구(globi)라고 부른다. 인공배지에서는 발육하지 않으며 확실한 배양법은 없다.
환자의 비강이나 피부 병소로부터 Ziehl-Neelsen 염색으로 항산균의 검출과 lepromin 반응을 실시한다. 인공배지에 배양은 안되나 설치류의 다람쥐에 접종하면 배양이 가능하다. 한센병균은 사람의 피부나 코 시원한 곳에서 잘 증식한다.
전 세계에서 약 1,200만 명의 한센병 환자가 있다. 나병 환자의 분포는 아프리카, 동남아시아, 중남미 국가에 주로 많이 발생된다.
- AFB 양성
- 인공배지에서 자라지 않는다.
비병원성(Mycobacteria)
잡균으로 자연계, 사람이나 동물의 피부, 점막, 변, 객담 등에 분포한다. Mycobacterium pheli(식물, 토양 등에 분포한다. ) 등이 있다. 1주인 이내에 발육되는 신속발육균으로 집락은 거칠고, 최적 발육온도는 섭씨 28도 이다. Nitrate 환원하고 집락 색소는 연한색이다.
05 그람음성막대균 (산소성, 조건무산소성)
11 장내세균과 (Family Enterobacteriaceae)
12 비브리오과 (Family Vibrionacea)
13 비발효성 그람음성막대균 (Nonfermentative Gram negative Bacilli, NFB)
14 영양요구성이 까다로운 그람음성막대균
15 특수배지가 필요한 만곡형 그람음성막대균 (Gram negative curved bacilli that are required to special media)
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미생물학 No.30
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