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미생물학 No.3

by cheshire_cat 2022. 7. 13.
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7) 기타 효소 및 독소
 - 히알루론산분해효소
결합조직인 히알루론산을 가수분해하여 조직 내에 침입을 확산시키는 효소이다.

 - Staphylokinase
섬유소용해효소 (혹은 섬유소용해독소) 라고도 하며, 플라스미노젠(Plasminogen)을 플라스민(Plasmin)으로 활성화하여 섬유소를 용해한다. 즉 응고된 섬유소를 용해시켜 생체 내로 세균의 침입을 도와주는 역할을 하고 있다. 이 효소의 활성화는 코아굴라제(Coagulase, 혈장응고효소) 시험에서 위음성 반응의 원인이 된다.

 - 젤라틴분해효소
젤라틴을 분해하여 액화시키는 능력이 있다. 젤라틴 액화효소로도 불린다. 

 - 그외 기타
lipase(리파아제 혹은 라이페이스, 지질분해효소), phosphatase, collagenase

*분리와 동정
 적절한 검체의 채취와 수송, 그리고 검체의 처리과정은 어떤 세균이든 간에 배양의 결과에 많은 영향을 미친다. 감염 부위에서 채취된 검체는 마르지 않고, 오염균이 못 자라게 빨리 검사실로 보내져야하는 것이 원칙이다. 

 감염된 부위의 화농성 분비물을 직접 도말하여 통상적인 세균염색법인 그람염색 (Gram Stain)을 실시하면 여러개의 그람양성알균과 많은 다핵형백혈구(PMN cell : polymorphonuclear cell)가 함께 관찰된다. 
배양된 집락의 그람염색상은 그람양성의 알균이 포도송이 모양으로 관찰된다. 
 직접도말표본의 현미경검사 결과와 상관없이 배양은 실시하는데 그 이유는 직접도말표본에서 세균을 관찰할 수 없더라도 배양에서는 양성을 나타내는 경우도 종종있기 때문이다. 통상 검체 내에 세균의 수가 적을 때는 직접도말 표본에서 세균을 관찰하지 못하는 경우가 종종 발생한다. 먄봉검체보다는 흡인액이 배양고 ㅏ도말검사에서는 더 안정적이고 유용한(유의미한) 결과를 보이며, 면봉검체로 의뢰할 때는 그람염색과 배양을 위한 각각 두 개의 면봉검체를 보내야 한다. 
 일반적으로 포도알균은 미생물 검사실에서 사용하는 일반배지에서 잘 자란다. 정상균무리나 오염 세균이 많이 혼재되어 있다고 생각되는 검체인 경우에는 선택배지로 만니톨식염배지(MSA, Mannitol Salt Agar), CNA배지(Columbia Colistin Nalidixic Acid Agar), 페닐에틸알콜배지(PEA, Phenylethyl alcohol Agar )등을 사용한다. 이때 페닐에틸알콜배지는 그람 음성균은 자라지 않는다. 

 포도알균속(Genus Staphylococcus)은 면양혈액우무배지(sheep Blood Agar, SBA)에서 섭씨 35~37도, 18~24시간 배양하면 직경 1~8mm정도의 흰색 또는 크림색의 둥글고 표면이 부드러운 집락을 만든것을 관찰할수 있다. 

 황색포도알균(Staphylococcus aureus)은 집락의 주위에 투명한 베타 용혈대를 만들며 노란색을 띄기도 한다. 표피포도알균(Staphylococcus epidermidis) 의 집락은 소형에서 중간크기이며, 용혈성이 없고(무용혈성) 흰색에서 회색을 보인다. 일부 종에서 용혈성을 보이기도 한다. 부생포도알균 (Staphylococcus sarprophyticus, S.sarprophyticus)은 비교적 약간 큰 집락을 만드는 것을 관찰할수 있는데 균주의 50%는 노란색 집락을 만든다. 용혈성 포도알균(Staphylococcus haemolyticus, S.haemolyticus)은 중간 크기의 집락과 중간 또는 약한 용혈성을 보이며 색소생성는 일정하지 않다. 
 Staphylococcus lugdunensis의 경우 용혈성은 간혹 나타나며 집락의 크기는 중간 정도이지만 간혹 소형집락변이 (small colony varient)가 일어날 수 있다.

 포도알균은 초기 배양과정에서 형태적으로 유사한 Micrococcus 속과 구별하는 것이 중요하다.

* 혈장응고효소 시험 (coagulase test)
포도알균속을 동정하는 첫 번째 과정은 혈장응고 시험으로 이 검사의 결과로 포도알균을 혈장응고효소 양성 포도알균(coagulase positive Staphylococcus, CPS)과 혈장 응고효소 음성 포도알균(coagulase Negative Staphylococcus, CNS) 로 구분한다. 
 S.aureus는 CPS에 속하며 따라서 이 검사를 이용하면 S,aureus와 그외 Staphylococcus spp.를 감별할 수 있다.

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